A375細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)細(xì)胞
A375細(xì)胞,細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于一196~C中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度**-25℃時(shí)可加速,到-80℃之后可直接投入內(nèi)(-196℃)。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)則直接將裝有細(xì)胞的凍存管投入40℃熱水中*解凍。
A375細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和**塵.細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室.
上海斯信生物科技有限公司依托復(fù)旦大學(xué),集研發(fā)、銷售、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)。產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、學(xué)、遺傳學(xué)、*學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營(yíng)產(chǎn)品:細(xì)胞株和菌株、胎牛、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。上海拜力生物的宗旨是以較高品質(zhì)、較低價(jià)格、較快供貨、較優(yōu)服務(wù)的“四較”要求為國(guó)內(nèi)廣大科研用戶提供較為完善的產(chǎn)品供應(yīng)渠道和售后服務(wù)。我們力求工作**,在處理客戶的咨詢、訂購(gòu)、到貨、售后服務(wù)、技術(shù)支持等方面追求較專業(yè)、較快捷、較及時(shí)。
A375細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。一般標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)室應(yīng)包括配液室、準(zhǔn)備室和培養(yǎng)室。三室既相互連接又相對(duì)獨(dú)立,各自完成培養(yǎng)過程中的不同操作
細(xì)胞培養(yǎng)室,選擇獨(dú)立房間,**凈臺(tái)應(yīng)放置在比較潔凈的房間,如果條件允許,按潔凈廠房要求設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)室,即使房間做不到空氣過濾,也至少應(yīng)是**的,進(jìn)出時(shí)要更換工作衣。
培養(yǎng)一個(gè)新的A375細(xì)胞時(shí)要特別注意培養(yǎng)基一致性的問題。因?yàn)閬碜杂诓煌瑥S家的培養(yǎng)基,即使名字相同或類似,配方也略有差異。仔細(xì)閱讀說明書,配方,標(biāo)簽,確保使用正確的培養(yǎng)基,細(xì)胞能適應(yīng)新的培養(yǎng)基。所有ATCC細(xì)胞系,在細(xì)胞信息中都注明了培養(yǎng)基。大多數(shù)情況下,推薦的培養(yǎng)基和都可以跟隨細(xì)胞一起購(gòu)買。
定期仔細(xì)的觀察培養(yǎng)基中A375細(xì)胞的形態(tài)和活性。肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基,檢查是否污染。這包括異常的pH變化(紅色變?yōu)辄S色或紫色)、渾濁度或有無顆粒。同時(shí),仔細(xì)檢查是否有小菌落,它們漂浮在液體和空氣交界面。特別是要檢查容器的邊緣,因?yàn)檫@些位置不易通過顯微鏡被檢查到。
A375細(xì)胞,大多數(shù)原代細(xì)胞、有限傳代細(xì)胞系和連續(xù)傳代細(xì)胞系都是單層貼壁細(xì)胞。其他細(xì)胞,尤其是那些來自造血或某些組織,是懸浮生長(zhǎng)的。
A375細(xì)胞,任何ATCC細(xì)胞系的生長(zhǎng)和增殖的詳細(xì)信息,參見運(yùn)輸包裝里提供的具體細(xì)胞系的產(chǎn)品說明書。簡(jiǎn)短版本的說明書,也可以在ATCC網(wǎng)站上找到。
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