為什么要使用二氧化碳培養(yǎng)箱
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生供給細胞
生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合
氣體環(huán)境中。CO2既是細胞代謝產(chǎn)物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關系。動物細胞多數(shù)
需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不出6.8~7.6為宜。在細胞培養(yǎng)過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會
變酸,因此常在培養(yǎng)基中加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個緩沖對)來調(diào)節(jié)pH。NaHCO3
具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應的進行。培養(yǎng)箱中CO2濃度應與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,
如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,
則NaHCO3的加入量應為3.95 g/L。 控制二氧化碳濃度,這就是為什么二氧化碳培養(yǎng)箱成為細胞或組織體外培養(yǎng)
環(huán)境可能之選的重要原因。
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詞條說明
高純氮氣發(fā)生器的安裝與使用? ? 高純氮氣發(fā)生器是根據(jù)電催化法進行空氣分離原理制成。其中電解池是利用燃料電池的逆過程設計而成。當作為壓力穩(wěn)定且純凈的原料空氣進入到電解池中,空氣中的氧在陰極被吸附而獲得電子并與水作用生成氫氧根離子并遷移到陽極,后在陽極處失去電子析出氧氣,因此空氣中的氧不斷被分離只留下氮氣。再經(jīng)過后級過濾、穩(wěn)壓、穩(wěn)流處理從而得到高純度的氮氣。 高純氮氣發(fā)生器的安裝
為了好的使用氮氣發(fā)生器,在使用前應當檢查儀器的進風口是否有雜物堵塞,注意清理,活塞密封圈有一定的壽命,使用完畢后請及時關閉儀器。儀器在使用一段時間后,電解液會逐漸減少,當電解液接近下限shi應及時補水,加液時不要過上限,切勿在未接空氣源時空載運行,否則會造成整個儀器報廢。如儀器停機一個月或一個月以上時間,請把電解液抽出,儀器如需搬運時,把儲液桶中的電解液用吸液管吸干凈,然后蓋好上蓋,以免在運輸
全自動氮吹儀工作原理:加快蒸發(fā)有兩個方法:加強它周圍的空氣流動和它的溫度。氮氣還是一種不活潑的氣體,也能起到隔絕氧氣的作用,防止氧化。氮吹儀就是通過這些原理達到了濃縮的目的。它將氮氣快速、連續(xù)、可控地吹到加熱樣品表面,實現(xiàn)大量樣品的快速濃縮。全自動氮吹儀使用方法:氮吹儀安裝好后,底盤支撐在恒溫水浴內(nèi),打開水浴電源,設定水浴溫度,水浴開始加熱。提升氮吹儀,將需要蒸發(fā)濃縮的樣品分別安放在樣品***架上
?血細胞計數(shù)原理細胞培養(yǎng)技術(shù)中,細胞計數(shù)是一項基本功,對于標準化培養(yǎng)條件以及需要定量的實驗來說都關鍵。這里介紹使用血細胞計數(shù)器對細胞進行計數(shù)的經(jīng)典方法以及中間一些需要注意的細節(jié)。制備細胞懸液:對于貼壁生長的細胞,我們需要使用胰酶消化的方法使細胞從培養(yǎng)皿表面脫落根據(jù)需要加入合適體積的培養(yǎng)基,將細胞進行中和及稀釋,以得到均質(zhì)的細胞懸液。要求盡可能將細胞吹打散開,不要殘留任何細胞團準備血細胞計
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