玉米赤霉烯酮免疫親和柱

    玉米赤霉烯酮免疫親和柱

    簡介
    ZEN免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、**要求低的樣品中玉米赤霉烯酮檢測的凈化??梢赃M(jìn)行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析,適用于谷物,食品,飼料等的樣品凈化過程。
    儲存條件:2 8 冷藏保存, 不可冷凍
    1、用途:用于實(shí)驗(yàn)室凈化樣品提取物以進(jìn)行進(jìn)一步分析
    2、概要:玉米赤霉烯酮首先從有赤霉病的玉米中分離得到 玉米赤霉烯酮其 產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬的菌 株玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物 。
    玉米赤霉烯酮具有雌激素作用,能造成動(dòng)物急慢性中毒,引起動(dòng)物繁殖機(jī)能異常甚至死亡 對人類的健康也造成很大威脅。**對食品,飼料中的玉米赤霉烯酮都有嚴(yán)格的**標(biāo)準(zhǔn)。
    3、原理:測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),免疫親和柱中含有和玉米赤霉烯酮抗體結(jié)合在一起的凝膠, 樣品中的玉米赤霉烯酮經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢的通過免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi) 玉米赤霉烯酮 與抗體結(jié)合, 其他的無關(guān)物質(zhì)不會(huì)結(jié)合而直接通過免疫親和柱, 之后洗滌免疫 親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。 最后加入甲醇將玉米赤霉烯酮 釋放, 然后注入到分析儀器中 進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。
    4、產(chǎn)品信息
    貨號、規(guī)格、數(shù)量、柱容量
    C14003、1mL、25支、≥500ng
    C15003、3mL、20支、≥750ng
    C15007、3mL、20支、≥1500ng
    C15207、3mL、100支、≥1500ng
    5、操作者應(yīng)注意事項(xiàng):
    ? 玉米赤霉烯酮對人體有害,應(yīng)戴手套操作。
    ? 使用過的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液較好用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
    ? 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
    ? 親和柱于2 8 冷藏保存,不可冷凍。
    ? 使用前,免疫親和層析柱需回至室溫 22 25 ℃)。
    6、操作流程
    ? 粉碎好的樣品過20 目篩并在取樣前徹底混合,不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存。
    ? 稱取20g 粉碎樣品及4g 氯 化鈉,加入100mL90% 乙腈/水。
    ? 高速均質(zhì)約5 分鐘,或震蕩器震蕩約30 分鐘。
    ? 4000轉(zhuǎn)離心5min或普通定量濾紙過濾。
    ? 取5mL 濾液加入20mL 純水,徹底混合用玻璃纖維濾紙過濾至澄清
    ? 將10mL 注射器連接于免疫親和柱上端。
    ? 取處理好的樣液10mL10mL(相當(dāng)于0.4g 樣品)以1 2滴/秒的速度通過免疫親合柱,棄掉流出的液體。
    ? 加10mL 水淋洗柱子兩次,棄掉流出的液體。
    ? 利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱中水分。
    ? 加入1mL 甲醇緩慢洗脫,流速約為2 3 秒每滴。
    ? 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。
    *糧谷類樣品用水稀釋,發(fā)酵類或雜質(zhì)干擾很大的樣品提取液,則用20mMPBS進(jìn)行較大倍數(shù)的稀釋(一般為10倍),以確保親和柱中玉米赤霉烯酮抗體與樣品提取液中抗原特異性結(jié)合的能力不受影響。
    *20mMPBS:0.62g NaH 2 PO 4 ?2H 2 O + 5.73gNa 2 HPO 4 12H 2 O+9g NaCl ,蒸餾水溶解并定容至1000 mL ,調(diào) PH 至 7.4 。

    7、操作流程圖操作流程圖

    8、液相色譜測定條件液相色譜測定條件
    ? 液相色譜柱:C18柱(柱長150mm,柱內(nèi)徑4.6mm;填料粒徑5μm),或相當(dāng)者;
    ? 熒光檢測器:激發(fā)/**波長:274nm/440nm
    ? 流動(dòng)相:乙腈-水-甲醇(46+46+8)
    ? 流速:1mL/min
    ? 進(jìn)樣量:20μL
    ? 柱溫:35℃
    用進(jìn)樣器吸取玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)工作液注入高效液相色譜儀,在上述色譜條件下測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)值(峰 高或峰面積),得到玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜圖。


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  • 詞條

    詞條說明

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