1、移液性重要性 無論在生物分子實驗領(lǐng)域還是其他分析測試領(lǐng)域,移液的性在整個實驗過程中都會起到至關(guān)重要的作用。一旦產(chǎn)生不可控的移液誤差,會直接影響整個測試數(shù)據(jù)的真實性,以及分析結(jié)果的正確性。因次,移液度是移液工作站重要的技術(shù)指標,沒有之一。
2、移液度的定義
準確度(Accuracy)是指測定結(jié)果與真實值之間的接近程度,以誤差來表示。一般用來表示系統(tǒng)誤差的大小。誤差越小,分析結(jié)果的準確度越高。精密度(Precision)是指使用同種樣品進行重復(fù)測定所得到的結(jié)果之間的重現(xiàn)性。一般用來表示測定過程中隨機誤差的大小。精密度通常以標準差或方差來量度,方差越小,精密度越高。
準確度和精密度
3、移液度影響因素
氣密性氣密性主要表現(xiàn)在二個方面,一是設(shè)備移液泵系統(tǒng)內(nèi)部的氣密性,二是移液吸頭(Tip頭)與barrel之間配合的連接氣密性。
環(huán)境眾所周知,移液過程的溫度、濕度、氣壓等外界環(huán)境都影響著移液度,為了避免不準確的移液結(jié)果:
①應(yīng)盡量將移液吸頭和液體保持在同一溫度范圍內(nèi);
②對溫度較低的液體進行移液時,在每次分液后換吸頭,以防止吸頭溫度的變化 。
液體性質(zhì)移液工作站在處理較粘稠狀態(tài)物質(zhì)時,使用原有吸排液參數(shù)進行移液,很有可能出現(xiàn)移液準確度誤差較大的情況,因此,在處理不同液體時要根據(jù)實際需要體積數(shù)值,來進行校準補償工作站移液泵的系統(tǒng)參數(shù)。
移液吸頭移液吸頭的原材料質(zhì)量、模具、生產(chǎn)工藝技術(shù)、生產(chǎn)設(shè)備等都直接影響到吸頭的質(zhì)量穩(wěn)定性,既而影響著移液的度。如吸頭材質(zhì)或模具光滑度都會影響液體的殘留。
4、度的檢測方法
1)精密度當測試體積小于1μL時,建議使用分光光度法檢測。將液體工作站設(shè)定調(diào)至目標體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的吸光度,重復(fù)幾次移液操作,計算移液的精密度。當測試體積大于1μL時,使用稱重法檢測。通過對水的稱重,重復(fù)稱量幾次待測樣本質(zhì)量,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),計算移液的精密度。精密度計算公式:CV:相對標準偏差(RSD)=標準偏差(SD)/計算結(jié)果的算術(shù)平均值(X)***
2 ) 準確度
通常我們采用稱量法進行準確度的檢測。通過對水的稱重,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),鑒別移液的準確性。
準確度計算公式:準確度A,V=平均體積,V0=各體積A%(準確度)=(V -V0)/V注意:稱重法實驗室條件是高度靈敏的分析天平(定期校準)、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸頭具有相同的溫度(20℃時水的密度為0.09982)。
測試中的注意點:
環(huán)境條件
溫度控制在15-30℃,恒定在±0.5℃,相對濕度50-80%
分析天平量程的確定
度測試體積的確定
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