海安水質細菌檢測、大腸菌群檢測

      目的比較多管發(fā)酵法(包括乳糖蛋白胨和EC―MUG培養(yǎng)基)與酶底物法(MMO―MUG培養(yǎng)基)測定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,為日常水質檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌選用一種佳檢測方法。方法依照《生活飲用水標準檢驗方法》GB中的多管發(fā)酵法與酶底物法測定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,進行方法的適用性試驗、靈敏度試驗、水樣加標試驗及實際水樣品檢測應用。

     

        結果適用性試驗結果為多管發(fā)酵法與酶底物法檢測結果顯示有某些菌株的差別;靈敏度試驗酶底物法約為1cfu100mL,多管發(fā)酵法約為1cfu100m;加標試驗結果三種培養(yǎng)基法無明顯差別;水樣品檢測兩種方法的結果差別無顯著性。結論多管發(fā)酵法與酶底物法檢測水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的結果差別無顯著性,但酶底物法只需一種培養(yǎng)基在24h內同時檢出大腸菌群和大腸埃希氏菌結果,操作較為方便、時間可節(jié)約24h-48h、結果觀察直觀容易。jsgfjc8788199

     

        生活飲用水一般不檢測大腸埃希氏菌、腸球菌的,也并沒有選擇五種指示菌(根本沒這說法),基本上都是以一類菌作為一個項目.

    其實生活飲用水的檢測項目有很多,但是如果沒有特殊要求,一般只做三項:細菌菌落總數(shù)、大腸菌群、耐熱大腸菌群,這些項目綜合體現(xiàn)了生活飲用水的水質和污染情況.

     

        如果你一定要問那兩個項目的意義,其實大腸埃希氏菌、腸球菌和耐熱大腸菌群的意義是基本一致的,都是體現(xiàn)水質受糞便污染的情況.其實耐熱大腸菌群就是因為適合我國國情、檢測成本低廉、方便直觀,這樣才以這個項目來代替大腸埃希氏菌的.

     

        固定底物技術酶底物法(Defined Substrate Technology)采用大腸菌群細菌能產生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色,以及大腸埃希氏菌產生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產生熒光的原理,來判斷水樣中是否含有大腸菌群及大腸埃希氏菌。固定底物技術酶底物法可以選用標準中推薦粉狀培養(yǎng)基(IDEXX公司的Coiliert試劑)來進行簡便的操作;*確認試驗;固定底物技術酶底物法檢測時間短,只需24小時即可同時定量出水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌的MPN值。

     

         操作步驟:

    1) 將一個Colilert試劑倒入裝有100ml水樣的無菌取樣瓶或無菌玻璃瓶中,混勻。(如圖1)

    2) 將瓶內的水樣全部倒入51孔或者是97孔定量盤中,以手撫平定量盤背面以趕除孔穴內氣泡,然后使用定量程控封口機進行封口。

    3) 將定量盤放在36±1℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24小時

    注:如檢測耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)則需放在44.5℃,培養(yǎng)24小時;如果培養(yǎng)時間**過28小時,則陰性結果則結果有效,如果為陽性結果則結果無效,需重做此水樣。

    4) 根據下面的結果解釋讀取結果。數(shù)出陽性格子數(shù)后對照MPN表得到結果。blob



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