許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都需要使用緩沖液來維持有效的pH,這很重要,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和酶對pH的變化敏感,因此為當(dāng)前和下游實(shí)驗(yàn)選擇正確的緩沖液至關(guān)重要。在本文中,我將簡要討論HEPES和PIPES在配置及使用過程中要考慮的一些重要因素,希望能對大家有所幫助。 如何制作HEPES及使用注意事項(xiàng) HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該緩沖液可用于多種生物的細(xì)胞培養(yǎng)基中。它也可用作蛋白質(zhì)研究中的結(jié)合緩沖液,用于陽離子交換洗脫實(shí)驗(yàn)中,以及在凝膠電泳中用作運(yùn)行緩沖液。 HEPES的制備步驟: 要制備1升1M HEPES緩沖溶液,請將238.30 g?GoldBio HEPES溶解?在750 mL dH?2?O中。使用10N調(diào)節(jié)至所需的pH。您可以在1M HEPES PDF協(xié)議中使用一張表。用dH?2?O填充至終體積1L,并通過過濾器或高壓釜滅菌。將緩沖液儲存在4℃。如果您使用的是HEPES鹽,請改用HEPES-Na方案。 注意事項(xiàng): HEPES可溶于水,價格*,并且通常具有生物惰性。但是,它確實(shí)參與了產(chǎn)生自由基的氧化還原反應(yīng),并干擾了DNA和限制性內(nèi)切酶之間的反應(yīng),但是由于空間位阻,其干擾程度小于Tris。同樣重要的是要注意,當(dāng)使用異質(zhì)連接蛋白通道時,不應(yīng)使用HEPES,因?yàn)樗鼤种破涔δ?。如果要進(jìn)行毒性研究,請選擇HEPES鹽而不是游離酸。 如何制作PIPES及使用注意事項(xiàng) PIPES是緩沖液家族的一員,與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液,在6.1至7.5的pH范圍內(nèi)有效。由于pH范圍與HEPES略有不同,PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。該緩沖劑不會與金屬絡(luò)合,因此可用于含金屬離子的溶液。它也可以用于色譜分析,電子顯微鏡固定植物細(xì)胞,以及代替草甘膦緩沖液。 PIPES的制備步驟: 要制備1升1M PIPES游離酸緩沖溶液,請將302.37g ?PIPES游離酸添加到600 mL dH?2?O中。使用10N調(diào)節(jié)至所需的pH值。您可以在1M PIPES PDF協(xié)議中使用一個表。用dH?2?O填充至終體積1L,并使用過濾器或高壓滅菌器滅菌。儲存在4?C。如果您使用的是PIPES鹽,請改用1M PIPES-Na PDF協(xié)議。 注意事項(xiàng): 直到溶液的pH值升高到6.5以上時,PIPES的游離酸才*溶解,但是PIPES的鹽很*溶解。如果使用的是游離酸形式的緩沖液,請使用將其轉(zhuǎn)化為鹽,以提高在較低pH下的溶解度。像HEPES一樣,PIPES不適用于涉及氧化還原反應(yīng)的實(shí)驗(yàn),因?yàn)樗鼤?dǎo)致自由基的形成。
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血清分離膠是一種帶有化學(xué)惰性并且可以幫助血液分離,常用于醫(yī)學(xué)這一塊上,其性質(zhì)是比較有粘性的,長時間也不會徹底干,而密度在1.045g/cm3-1.065 g/cm3,而這卻是恰恰在血清和血塊的密度中間,所以很多時候都會直接用來做血清和血塊的分離使用,特別是在通過離心的作用下促使血清分離膠翻轉(zhuǎn)到采血管*,將血清與血塊完全隔開,快速地分離出理想的血清,從而預(yù)防血細(xì)胞、血清之間的物質(zhì)交換,保持血液的較
生物緩沖液通常由共軛堿和弱酸或共軛酸和弱堿組成,其中我司主要生產(chǎn)的有Tris、Hepes、Mops等等。緩沖液是一種有助于維持穩(wěn)定的pH值的溶液,一項(xiàng)成功的研究必然有著選擇使用了正確的緩沖液。在下文,將給大家介紹選擇生物緩沖液時需要考慮的五個方面。 1、pKa值 由于大多數(shù)生物反應(yīng)都會在6-8的pH值之間發(fā)生,因此選擇具有正確pKa值的緩沖液非常重要。在選擇緩沖液之前,有必要弄清楚該實(shí)驗(yàn)適合的pH
HEPES HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該緩沖液可用于多種生物的細(xì)胞培養(yǎng)基中。它也可用作蛋白質(zhì)研究中的結(jié)合緩沖液,用于陽離子交換洗脫實(shí)驗(yàn)中,以及在凝膠電泳中用作運(yùn)行緩沖液。 HEPES的制備步驟: 要制備1升1M HEPES緩沖溶液,請將238.30 g HEPES溶解 在750 mL水中。使用10N氫氧化
具體的說:氫鍵不單組成單一的共價鍵,在必定條件下它還與其它負(fù)電荷的分子間組成一個弱氫鍵,在常溫下氫鍵斗勁轉(zhuǎn)輕易被切斷激起再連系。血清分離膠的手藝指標(biāo): 血液離心分離時刻:5~10分鐘; 粘度:20~40×104cp(20℃); 血液分離下場:血清和血塊較著分離,血清分離膠層均一,無掛壁現(xiàn)象。做離心時分離膠配方或工藝啟事; 分離膠供給商質(zhì)量不不變城市造成數(shù)值不切確 不妥的運(yùn)輸轉(zhuǎn)運(yùn)波動,觸發(fā)分離膠的觸
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