Good’s緩沖液HEPES和PIPES教你如何選擇？

時(shí)間：2022-01-05作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：204

我們?cè)谑褂?span>Good’s緩沖液的時(shí)候，總是不經(jīng)意的把Good’s緩沖液中的HEPES和PIPES弄混，認(rèn)為它們是一樣的，導(dǎo)致無(wú)法很準(zhǔn)確的區(qū)別開。其實(shí)它們之間有共性但是也存在著很多不同的特性。特別是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中，一點(diǎn)細(xì)微的差別可能就導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的失敗。所以我們要清楚什么是緩沖液，它是做什么的？才能去區(qū)分緩沖液中HEPES和PIPES它們之間的差別到底在哪里？我們?cè)谑褂脮r(shí)應(yīng)該注意些什么？

緩沖液是一類**于生命科學(xué)研究的緩沖體系，在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，緩沖溶液起著不可或缺的作用，它能夠抵制外界少量強(qiáng)酸和強(qiáng)堿的影響，為體系維持貼近生理環(huán)境的pH值。HEPES和PIPES緩沖液都是生物實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液。

HEPES的pH緩沖范圍是6.8-8.2，是一種兩性離子生物緩沖劑，溶于水，不與金屬離子形成穩(wěn)定的配合物，多數(shù)情況下，不會(huì)干擾生物化學(xué)過(guò)程，可廣泛應(yīng)用于多種生物化學(xué)反應(yīng)，并在某些細(xì)胞培養(yǎng)基中用作緩沖試劑。HEPES常用于各種類型生物體的細(xì)胞培養(yǎng)基中；在蛋白質(zhì)研究中，PIPES常用作陽(yáng)離子交換色譜法中結(jié)合緩沖液的組分和洗脫液；在DNA研究中，PIPES用作磷酸鈣和DNA沉淀物形成體系的緩沖液，AFM以及電穿孔實(shí)驗(yàn)中的緩沖液。另外，HEPES對(duì)DNA和限制酶之間的反應(yīng)有一定干擾，也不適合用于Lowry氏法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。HEPES緩沖液常用于細(xì)胞器和較易變性的、對(duì)pH敏感的蛋白質(zhì)和酶的研究工作，以及生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。它是一種氫離子緩沖劑，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。

PIPES的pH緩沖范圍是6.1-7.5，不溶于水，溶于NaOH水溶液。PIPES不同于含二（2-羥乙基）氨基基團(tuán)的緩沖劑（如Bis-tris，Bicine），與多數(shù)金屬離子不能形成穩(wěn)定配合物，適用于含有金屬離子的溶液體系中的緩沖劑。根據(jù)已有的研究結(jié)果，PIPES可被應(yīng)用于使用磷酸纖維素色譜純化微管蛋白，用于凝膠過(guò)濾法純化重組GTP結(jié)合蛋白ARF1和ARF2，作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶。另外，由于PIPES能形成自由基，因此不適合應(yīng)用于氧化還原體系。在陽(yáng)離子交換色譜法，應(yīng)當(dāng)使用低濃度的PIPES緩沖液，這是因?yàn)?span>PIPES具有相對(duì)較大的離子強(qiáng)度，而且其pKa值具有濃度依賴性。       

以上可知PIPES和HEPES都不能和金屬離子形成穩(wěn)定的配合物，適合于含有金屬離子的溶液體系。但它們之間也具有一定的差異性，溶解性方面，PIPES不溶于水，而HEPES具有良好的水溶性；緩沖范圍方面，PIPES偏酸性到中性，HEPES偏中性到堿性，這主要是由于兩者的結(jié)構(gòu)差異決定的，PIPES有兩個(gè)磺酸基，HEPES含有一個(gè)磺酸基和羥基。另外，PIPES和HEPES在某些體系應(yīng)用中有一定限制。因此，我們?cè)谶x擇上述緩沖劑的時(shí)候，需要綜合考慮實(shí)驗(yàn)體系的適合性以及兩者性質(zhì)的差異性。

我們要學(xué)會(huì)區(qū)分了解這些試劑中的同與不同，這樣才能好的促進(jìn)我們不同產(chǎn)品的研發(fā)及生產(chǎn)。德晟一直秉承著這種不放過(guò)一絲細(xì)微的差別，才能一直不斷的的去研發(fā)生產(chǎn)出好的產(chǎn)品。





專注于等

• 詞條

  詞條說(shuō)明

• hepes buffer是什么試劑

  hepes buffer是指的HEPES緩沖劑，HEPES就是2-（4-（2-羥乙基）哌嗪）乙磺酸，CAS號(hào)7365-45-9。這種緩沖劑通常用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值，像病毒保存液或者細(xì)胞保存液中就含有這個(gè)成分。市場(chǎng)上的羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES有粉末試劑和溶液試劑兩種類型。HEPES溶液的使用濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。

• Good’s緩沖劑PIPES生廠商-德晟

  PIPES全稱哌嗪-1,4-二乙磺酸，能使溶液pH值在一定范圍內(nèi)維持基本恒定的物質(zhì)。當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用生物緩沖劑，這樣的溶液叫做緩沖溶液。PIPES是Good’s緩沖劑中的重要一員，Good’s緩沖液是一類**于生命科學(xué)研究的緩沖體系，其不參加和不干擾生物化學(xué)過(guò)程。PIPES的pH緩沖范圍是6.1-7.5，不溶于水，溶于NaOH水溶液。PIP

• HEPES對(duì)于金納米星的形成與穩(wěn)定有怎樣的作用？

  金納米星，可能有許多人還不知道是何物質(zhì)。金納米星是指被塑造成星狀物的金微粒，金微粒能夠被送往一個(gè)**，進(jìn)而被激光或磁場(chǎng)所操控，并終通過(guò)加熱惡性**細(xì)胞來(lái)消滅它們。納米金星使燃燒熱。納米金星是攻擊癌癥的一種新材料，如今，研究人員指出，金微粒如果被塑造成星狀物則能夠燃燒得熱。而其中合成金納米星的常用方法是采用Good’s緩沖液HEPES、EPPS以及MOPS的無(wú)核和無(wú)表面活性劑的策略。這些試劑可以作為

• EDTA二鈉在化妝品中的利與弊

  EDTA二鈉在化妝品中主要是作為一種活性成分使用，它可以螯合化妝品中的金屬離子。因?yàn)樵诨瘖y品的生產(chǎn)過(guò)程中，無(wú)論是生產(chǎn)原料、生產(chǎn)設(shè)備、還是水都有可能會(huì)帶入金屬離子。這種金屬離子不僅會(huì)傷害皮膚、還會(huì)影響化妝品的品質(zhì)。EDTA二鈉可以在化妝品中準(zhǔn)確的找到金屬離子，抑制它的破壞作用。除此之外EDTA二鈉還有防腐抑菌的作用，雖然在面對(duì)“革蘭氏陽(yáng)性菌”時(shí)效果不**，但是搭配其他防腐劑一起使用也能起到很好的效果