氨丁三醇Tris緩沖液配制細(xì)則

時(shí)間：2022-01-18作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：46

氨丁三醇CAS77-86-1，簡(jiǎn)稱(chēng)Tris，俗名三羥甲胺或者三羥，配制成的緩沖液pH范圍7-9，離子強(qiáng)度低，這個(gè)pH范圍的適用于大多數(shù)生物化學(xué)反應(yīng)。因此Tris緩沖液廣泛的用于蛋白質(zhì)電泳、蛋白質(zhì)印跡、核酸瓊脂糖凝膠電泳等實(shí)驗(yàn)。

氨丁三醇Tris有著比緩沖液較優(yōu)越的性能，但又比較專(zhuān)業(yè)的緩沖液（HEPES、PIPES等）價(jià)格成本要低許多，所以使用Tris緩沖劑用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是**選擇。Tris在溶液中的解離常數(shù)pKa為8.1（25度），有效的緩沖范圍是7.1-9.1，能滿足絕大多數(shù)生化實(shí)驗(yàn)。

Tris溶液本身顯堿性，通常搭配酸一起組成緩沖體系，常用的就是Tris-HCl緩沖液。其配置方法通常使用如下兩種：

1.將Tris試劑粉末溶于水，然后與溶液以不同比例混合，以獲得不同pH的Tris-HCl緩沖溶液。

2.直接將Tris-HCl試劑粉末溶于水，可以直接獲得對(duì)應(yīng)pH值的緩沖液；Tris-HCl的等分試劑配制成的特定pH值的緩沖液，調(diào)節(jié)pH可與HCl溶液混合（或Tris溶液調(diào)節(jié)）。

配制Tris-HCl緩沖液時(shí)，用HCl調(diào)節(jié)pH值，然后將緩沖液補(bǔ)足至所需體積。假設(shè)在調(diào)節(jié)pH值時(shí)沒(méi)有過(guò)沖，則該方法不會(huì)改變緩沖液的離子強(qiáng)度。

但是，在過(guò)沖并用NaOH調(diào)節(jié)pH或者用Tris HCl重新調(diào)節(jié)并用NaOH調(diào)節(jié)pH之后，由于NaOH是強(qiáng)電解質(zhì)，離子強(qiáng)度會(huì)發(fā)生變化。根據(jù)Tris緩沖液不同的預(yù)期用途，這種改變可能會(huì)造成影響。

在Tris緩沖液的配制過(guò)程中通常需要調(diào)節(jié)pH值，測(cè)pH值時(shí)要使用與Tris兼容的電極。當(dāng)與Tris緩沖液一起使用時(shí)，單結(jié)Ag / AgCl電極可能表現(xiàn)出不穩(wěn)定性，因?yàn)殂y會(huì)逐漸沉淀并堵塞電極。使用雙結(jié)或甘汞參比電極可確保在Tris緩沖液中進(jìn)行準(zhǔn)確的pH測(cè)量，不會(huì)形成沉淀堵電極。

氨丁三醇Tris試劑有各種各樣配制好的緩沖體系，除了Tris-HCl，還有TE、TBS、TAE、TBE等。德晟生產(chǎn)的主要是Tris試劑原料，可以制作上述多種緩沖液，而且需求量非常大。




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