Tris作為生物緩沖劑家族中的中流砥柱,是合成Bis-Tris,TES,TAPS中是**的反應物。后面幾種均為生物化學實驗和分子生物學實驗中經(jīng)常使用的緩沖劑,他們結構中都含有Tris的分子結構。下面我們來列舉tris和以他合成的Bis-Tris這兩種常用化學物質(zhì)的應用場景,淺析它的優(yōu)越化學性能。
三羥(行業(yè)常稱作Tris),25°C下其pKa為8.04,緩沖范圍7.0~9.0。其常用實驗如下:
(1)常用于凝膠電泳緩沖液中,例如TAE或TBE;
(2)常用于制備Laemmli緩沖液;
(3)常與甘氨酸和SDS一起制備運行緩沖液和上樣緩沖液;
(4)可以用作陰離子交換層析中的結合緩沖液和洗脫液;
(5)被用作RNA雜交和DNA裂解的緩沖液。
在Tris的使用中,需要注意:Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大,我們在配制過程中要特別注意應用環(huán)境的影響因素;Tris的伯胺基在特定條件上與多種分子發(fā)生反應,包括RNA抑制劑,常見金屬如Ag+,Co2+和Cu2+等,酶,Tris不適合測定。
Bis-Tris,雙(2-羥乙基)氨基(三羥),兩性陰陽離子緩沖劑,25°C下pKa為6.46,pH緩沖能力范圍為5.2~7.8。其應用領域如下:
(1)作為各種類型電泳的樣品緩沖液,凝膠緩沖液和儲存保質(zhì)緩沖液;
(2)作為陰離子交換色譜法中的緩沖液;
(3)被用于鹵代烷烴脫鹵酶結晶過程的X射線晶體學研究;
(4)低導電性和高靈敏度,是核磁共振光譜的有效緩沖液;
(5)與人肝臟型脂肪酸結合蛋白(FAB)相互作用并影響蛋白質(zhì)動力學。
Bis-Tris與Fe3+和Cr3+形成絡合物,與許多常見金屬形成絡合弱復合物,因此在含有金屬離子的溶液中使用時,應考慮其絡合因子的范圍。此外,在有系統(tǒng)壓力變化的反應釜,可使用Bis-Tris緩沖溶液。Bis-Tris是鹽的替用品以避免其高毒性,但同樣不測定。
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詞條說明
血清分離膠是一種疏水性的**化合物,它是一種粘性流體,其結構中含有大量氫鍵,由于氫鍵的締合作用形成網(wǎng)狀結構。在離心力的作用下,網(wǎng)狀結構被破壞,變成粘度低的流體。當離心力消失之后又重新形成網(wǎng)狀結構,恢復成粘度高的流體。它是分離血清(血漿)和血球的物質(zhì),主要用途在于其可在血液的細胞成分和血清之間形成隔離層,防止血細胞和血清間的物質(zhì)交換,在一定時間內(nèi)保證血液樣本的原始性狀,使檢測結果較加準確。在臨床檢驗
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