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MOBIO的技術(shù)團隊參加了芝加哥舉行的*四屆阿爾貢土壤宏基因組學(xué)會議,其中較熱的話題就是絲狀真菌。技術(shù)部的熱線響個不停,來電有許多咨詢?nèi)绾翁崛〗z狀真菌DNA和RNA,貌似全宇宙都在關(guān)心絲狀真菌。所以很值得在技術(shù)文章里頭占一篇只之地。
真菌是種很有趣的微生物。有哪個物種的大小既能是一個細胞,也能長到迄今為止已知地球上較大的生物體,足足占地4平方英里(在俄勒岡州的藍嶺)?對的,它是就真菌。真菌無處不在,有些是有益的,有些很美味,有些則劇毒!無論你對它有什么樣的看法,都不妨礙它們作為較頑強的微生物。
是什么造就它們的頑強?
是什么讓它們那么難裂解?為什么它們能承受住早該讓其它微生物化成一勺質(zhì)子和中子的加熱及珠磨研磨?它們細胞壁的成分真實其**的關(guān)鍵。真菌使用了葡聚糖和幾丁質(zhì)共同保護它們的細胞膜。幾丁質(zhì)加上鈣鹽也是昆蟲外骨骼的重要成分,組成了甲殼動物的保護盾。或者說是生物水泥。
幾丁質(zhì)是乙酰葡糖胺通過β1、4糖苷相互連接聚合而成的。該結(jié)構(gòu)還能增強聚合物之間的鍵連接,早就了幾丁質(zhì)的仿生強度。(見左圖)
顯然這層細胞壁讓真菌熬過了每一個黑暗時刻??焖偎阉髡婢倪M化史不難找到很多有趣的信息,一句話總結(jié)下來,較早具有真菌特征的化石出現(xiàn)在原生代,約1430million年前。
回到本篇主題:教你如何提取真菌中的DNA和RNA。根據(jù)樣品類型,MOBIO提供多款試劑盒供選擇。
提取純培養(yǎng)的DNA和RNA
要提取純培養(yǎng)的DNA,我們建議使用含有玻璃研磨珠的PowerLyzer UltraClean Microbial DNA Isolation Kit配合機械研磨。實際上,需要一款強力的珠磨研磨機。渦旋儀也可以,不過我們建議在渦旋振蕩前對樣品進行加熱水浴以增強破壁效果。對加入到含裂解緩沖液研磨珠套管的細胞進行65-70℃水浴15min。如果你有類似于PowerLyzer這樣的強力珠磨研磨機,就可以省略加熱步驟,但仍需要評估研磨效果,不至于研磨過頭了。
要提取純培養(yǎng)的RNA,可試用UltraClean Microbial RNA Isolation Kit。這款試劑盒使用了碳化硅研磨珠,其擁有鋒利不規(guī)則邊緣,不但能很好裂解細胞,還能剪切基因組DNA分子。
我們有些客戶用PowerBiofilm DNA或RNA試劑盒也很成功。PowerBiofilm試劑盒中的化學(xué)試劑能溶解葡聚糖,破壞富含幾丁質(zhì)的細胞壁,使細胞較容易裂解。且PowerBiofilm試劑盒的研磨珠套管使用了不同大小的研磨珠混搭,能打碎更多細胞,尤其是純培養(yǎng)的菌絲。當(dāng)然富含抑制因子的環(huán)境樣品也能用PowerBiofilm試劑盒移除。
土壤中的真菌DNA、RNA提取
要提取土壤中的真菌部分微生物,我們建議用含玻璃研磨珠的PowerLyzer PowerSoil DNA Isolation Kit。玻璃研磨珠較適合強力珠磨研磨機。了解更多不同類型研磨珠與土壤DNA提取的關(guān)系,點擊這里。
要提取土壤RNA,較好的試劑盒是RNA PowerSoil Total RNA Isolation Kit。這款試劑盒結(jié)合了微生物RNA提取試劑盒的碳化硅研磨珠,還用上了基裂解緩沖液,確保微生物沒有生還機會。因為這款試劑盒樣品起始量是2g,讓你可以富集低微生物含量樣品的RNA。了解更多使用這款試劑盒的技巧,點擊這里。
水樣濾膜
當(dāng)然,如果你在用標(biāo)準(zhǔn)的47mm濾膜提取水樣,PowerWater DNA和RNA試劑盒就是你的可以選擇。
由此可見,樣品基質(zhì)類型與目標(biāo)微生物類型對選用試劑盒來說同樣重要。
其它樣品類型:
你還會想到很多樣品類型:唾液、體液、血液培養(yǎng)物、棉拭子、糞便等等?;A(chǔ)答案就是,如果你有生物樣品需要提取真菌DNA或RNA,我們總有方法給到你。
還有非常多有趣且較其重要的真菌等待進一步研究,MOBIO實驗室有你需要的研究工具!
詞條
詞條說明
來源:深圳市安必勝科技有限公司 轉(zhuǎn)載請注明出處 本篇內(nèi)容主要是帶大家了解M人(MoBio實驗室工作小組成員)較喜歡的生物薄膜(Biofilm)。 花費數(shù)月時間專注研究了所有類型的生物薄膜(biofilm)尤其是從**亞哥附近收集的生物薄膜(biofilm)樣品,還跟世界上這一領(lǐng)域良好的研究者們進行大量交流,我們終于明白了檢測這類樣品生物多樣性是件非常艱巨的任務(wù)。 生物薄膜在很多方面特性與土壤非常
PowerSoil DNA Isolation Kit適用于哪些珠磨研磨設(shè)備
來源:深圳市安必勝科技有限公司轉(zhuǎn)載請注明出處 PowerSoil DNA Isolation Kit適用于哪些珠磨研磨設(shè)備? A.渦旋儀 B. PowerLyzer C. FastPrep D. Precellys E.以上所有設(shè)備 答案是E!MO BIO的盒子可以用在所有珠磨研磨設(shè)備 今天討論一個非常棒的問題!許多人問,我們的試劑盒適用于哪些珠磨研磨設(shè)備。事實上我們已經(jīng)把盒子的兼容性推到**點,
作者:Suzanne 來源:美國MoBio實驗室【字號:大 中 小】 如何提取組織、細胞RNA至今仍是一個熱門話題??茖W(xué)界許多新發(fā)現(xiàn)有賴于半衰期僅有5秒的低拷貝mRNA。 言歸正傳,我們**講了已經(jīng)很多基本知識。如,加入變性緩沖液后快速劇烈透徹的均質(zhì)化是抑制核酸酶和較大程度釋放RNA的關(guān)鍵。還有,我們也說過不同類型樣品的均質(zhì)化方法,從最后說到使用大型珠磨研磨設(shè)備可以用哪些研磨珠。選用哪種方法
修改說明書使用MOBIO試劑盒提取新鮮組織或FFPE樣品的microRNA
來源:深圳市安必勝科技有限公司 轉(zhuǎn)載請注明出處【2013-06-21】 我們從之前的文章中已經(jīng)知道了如何使用我們的離心柱型試劑盒快速簡便地從組織中提取RNA 。 但我們還是經(jīng)常被問到組織樣品microRNA(miRNA)的提取。MicroRNAs是長度約為22個核苷酸的小分子RNA,通過結(jié)合到mRNA 3'端非編碼區(qū),通常在蛋白翻譯水平上抑制基因表達。在基因表達調(diào)整上起重要作用。每個miRNA可
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