常州武進化學(xué)試劑教你如何選擇液相色譜固定相

    反相液相色譜可供選擇的固定相種類繁多令人眼花繚亂,即使是某一種固定相(例如C18)的可選擇種類也是很多的。
        老實說,我們的很多方法開發(fā)都是在嘗試和錯誤中進行,這些都是基于我們喜愛的供應(yīng)商提供的成熟的或者新興的固定相。即使是**的含有仔細考量的正交化及電腦**洗脫設(shè)計的“篩選”平臺,有時也不得不采取“色譜的本能”。
        反相色譜中的保留是基于被分析物、流動相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠表面的活性和其可接觸性之間的平衡。 想要搞清楚影響分離效果的保留機理,就要考慮并明確化學(xué)鍵合相、活性硅膠表面的處理、硅膠表面的可接觸性等因素,這些都將影響色譜柱的原始選擇性及方法開發(fā)的優(yōu)化。
        在大多數(shù)反相分離中色散作用是起主要作用的,尤其是那些使用未改性的烷基配體(C18、C8、C4),其保留能力是與被分析物的疏水性成正比的。含有芳香基團或不飽和基團的固定相或被分析物進行分析時,電荷轉(zhuǎn)移(或π-π)作用是起主要作用的。偶較-鍵相互作用對于極性化合物的保留是很重要的,含有“氰基”的固定相會增強對極性化合物的保留。被分析物的電離部分與硅膠表面之間存在靜電作用力,這是由于硅膠表面有殘留的可離子化的硅醇基。
        當前有許多色譜柱分類系統(tǒng)存在,這些系統(tǒng)都是基于對已知化學(xué)探針物質(zhì)的檢測,從而來描述固定相的*特特性。一個非常有用的例子就是美國藥典(USP)網(wǎng)站中的產(chǎn)品質(zhì)量研究數(shù)據(jù)庫(也就是PQRI系統(tǒng)),網(wǎng)址是:。該數(shù)據(jù)庫采用保留(1,2)的疏水減法模型來描述固定相的疏水性(H),判斷疏水性類似而有不同形狀或流體力學(xué)體積的被分析物的空間結(jié)構(gòu)選擇性參數(shù)(S),在pH值為7.0和2.8時的鍵(作為路易斯酸或路易斯堿)和靜電作用參數(shù)(C)。pH值為7.0時硅醇基活性很強,pH為2.8時具有酸性的硅醇基將會與極性或可離子化的被分析物發(fā)生作用產(chǎn)生拖尾。*特的或正交的固定相一般會有較大的S、B和C(7.0)值。這些大型的數(shù)據(jù)庫對于比較固定相的特點是很有用的,“雷達圖”也是另一種比較固定相特點的有用方式。
        表一總結(jié)了一些當前常用固定相的分類及其相關(guān)應(yīng)用領(lǐng)域。
        表一:一些主要固定相分類及其主要應(yīng)用
    固定相 
    配體 
    應(yīng)用 
    C18(烷基) 
    -C18H37 
    大多數(shù)烷基固定相可保留藥物,類固醇,脂肪酸,鄰二酯,環(huán)境污染物 
    極性嵌入C18 
    -C16H33NO 
    對氨基酯及其類似物質(zhì)等極性強的被分析物保留較強,能夠達到較好的分離效果。 
    氰基(氰) 
    -(CH2)3CN 
    對于極性化合物及有多重不同化學(xué)成分的溶質(zhì)有*特的選擇性 
    基(二基) 
    -C6H5(-C12H9) 
    
    	芳香族和中等極性化合物 
    

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