奧林巴斯暗場顯微鏡故障排除

    問題:
    照明不足以使樣品可見,或者樣品可見但非常暗淡。
    解決:燈泡電壓可能設(shè)置得太低,或者燈泡強度不足以正確照亮樣品。將電壓升至較大約12V(對于12V,100W鹵素燈泡),或者在可能的情況下用較大的強度更換光源。如果這樣不能解決問題,請檢查底下聚光鏡,以確保其位置正確,并且具有合適尺寸的視場光闌。另外,請檢查彩色和/或中性密度濾光片,偏光片,延遲片或可能降低照明強度的任何其他組件的光路。 
    如果反射聚光鏡的數(shù)值孔徑較高時出現(xiàn)此問題,請檢查以確保聚光鏡**部鏡頭正確涂油到顯微鏡載玻片的底部。如果浸入式接觸已損壞,重新涂抹油并架起聚光鏡,直到**部鏡片完全浸入油中并接觸到載玻片的底部。
    問題:
    視場在中心有一個黑點,降低了照度,但周邊的物體照得很好,看起來很正常。
    解決:子系統(tǒng)聚光鏡的位置不正確,或者光圈對于物鏡尺寸不合適。在觀察視野中的標本時小心地上下放置聚光鏡。檢查以確保聚光器光圈和場光闌都設(shè)置在大開位置。如果這不影響照明,請改變視場光闌尺寸,使其稍大或稍小,然后重新檢查照明。 
    當使用厚度過大(大于標準毫米)的顯微鏡載玻片時,偶爾會出現(xiàn)這個問題。使用千分尺或一組撥號卡尺來確定載玻片和載玻片/蓋玻片組合的厚度。如果載玻片太厚,或者換成正確厚度的載玻片或者檢查聚光鏡,以確定是否可以調(diào)節(jié)以補償不同厚度的載玻片。
    問題:
    燈泡的使用壽命很短,燈泡內(nèi)部用黑色蒸發(fā)鎢涂層燒結(jié)。
    解決:燈泡長時間使用電壓過高,這**會縮短使用壽命。樣品觀察和/或顯微攝影后,更換燈泡并降低燈泡電壓。
    問題:
    圖像的中心有明暗區(qū)域,有或沒有暗區(qū)。
    解決:當子系統(tǒng)聚光鏡未正確居中或視場光闌太小時,此問題很常見?;謴?fù)明場并重新建立科勒照明條件,然后重復(fù)暗場過程,確保聚光鏡居中。如果這沒有幫助,則增加視場光闌的大小,直到建立適當?shù)陌祱鰲l件。 
    當使用暗場聚光鏡的數(shù)值孔徑太高的物鏡時,也可能出現(xiàn)此問題。如果物鏡內(nèi)部有一個虹膜光闌,請減小虹膜開口尺寸,以確定是否有太多的斜光照射進入物鏡的前透鏡。此外,它可能有助于增加視場光闌的大小或改變?yōu)檩^高數(shù)值孔徑的反射暗場聚光鏡。
    問題:
    視場的外圍僅在一側(cè)明亮。
    解決:檢查物鏡轉(zhuǎn)盤以確保物鏡正確定位在顯微鏡的光軸上。當物鏡被正確定位時,有一個制動器停止,應(yīng)該產(chǎn)生一個積極的“咔噠”聲。如果場停止不正確居中,也可能出現(xiàn)問題。取下目鏡并將相位望遠鏡放入眼管(或使用Bertrand鏡頭),然后使用對中螺絲正確對準視場光闌。
    問題:
    標本的圖像不清晰,缺乏足夠的對比度和細節(jié)。
    解決:樣品可能不適合暗場顯微鏡。許多染色的標本不能散射足夠的光線,以便在暗場條件下清晰地成像。試樣厚度也可能是一個問題,因為非常薄的試樣通常不能很好地用暗場聚光鏡**的傾斜光線成像。更改為明場,相差,DIC或霍夫曼,以確定這是否改善標本對比度。
    問題:
    明亮的焦點區(qū)域阻礙了暗場標本的觀察和/或顯微攝影。
    解決:這可能是由于聚光鏡上方某處光學表面的灰塵,毛發(fā),纖維和/或污垢污染。用光學組織或棉花徹底清潔載玻片。偶爾,由于物鏡前鏡頭上的污染而出現(xiàn)此問題。小心地將物鏡從物鏡轉(zhuǎn)盤中的座位上松開,然后慢慢轉(zhuǎn)動,同時通過目鏡觀察標本。如果障礙物隨物鏡旋轉(zhuǎn),則可能是前鏡頭上的灰塵。輕輕地呼氣,取下物鏡并弄濕前鏡片,然后用鏡頭紙或包裹在長木桿上的棉簽清潔。更換物鏡并檢查確定阻塞已被完全清除。
    問題:
    背景均勻照明,但不是完全黑暗或呈現(xiàn)灰色。
    解決:當不透明的字段停止對于物鏡太小時,通常會發(fā)生此問題。使用相差望遠鏡或在光路中沒有標本的Bertrand透鏡,取下目鏡并觀察物鏡的后焦平面。整個后焦面應(yīng)該是黑暗的,周邊沒有任何明亮的光線。如果在物鏡的后焦平面上觀察到弧光或圓弧,請改為稍大的視場光闌。此外,減小視場光闌的大小將有助于抑制眩光并產(chǎn)生黑色背景(注意不要太多關(guān)閉此光闌孔徑光闌)。
    問題:
    燈電容器的圖像部分填滿視場,模糊了標本的細節(jié)。
    解決:滑片可能太薄或聚光鏡可能調(diào)整得太高。測量顯微鏡載玻片的厚度并檢查以確保油接觸不被破壞。如果遇到困難,請保持載玻片底部上油,請嘗試使用較厚的載玻片。
    問題:
    顏色出現(xiàn)在背景中,或背景不均勻,灰色陰影。
    解決:整個安裝座非常厚或者在安裝介質(zhì)中捕獲到太多光散射污染偽影時,通常會出現(xiàn)此問題。關(guān)閉視場光闌并旋轉(zhuǎn)載玻片以找到較佳方位,然后確定問題是否已得到糾正。試樣可能需要重新安裝在較薄的安裝座上,或者安裝介質(zhì)可能需要過濾。用軟鏡頭紙或棉簽仔細清潔整個顯微鏡載玻片和蓋玻片。
    問題:
    在水中觀察水生生物時,樣本會不斷向一個方向漂移,使觀察和顯微攝影變得困難。
    解決:由于蓋玻片邊緣的蒸發(fā)緩慢,正在產(chǎn)生對流。在蓋玻片周圍放一塊凡士林或Cytoseal固定介質(zhì),將其牢固地密封在顯微鏡載玻片上。商業(yè)產(chǎn)品可以添加到水中以減緩這些微生物的移動,使它們較容易拍攝。
    問題:
    通過10倍物鏡觀察樣品時,視野*有一個橢圓形的光點。
    解決:燈泡聚光器可能會被錯誤地聚焦,或者擴散濾光片可能會丟失,從而導(dǎo)致出現(xiàn)在視場中的燈絲圖像。重新聚焦聚光鏡,確保光路中有擴散濾光片。
    問題:
    視場有明亮的斑點,并且存在實現(xiàn)樣本尖銳焦點的問題。
    解決:小氣泡可能會被困在聚光鏡**部和顯微鏡載玻片底部之間的油中。取下目鏡(或插入Bertrand鏡頭)觀察物鏡的后焦面,氣泡可見。為了補救,打破油接觸,并用棉簽清除任何殘留的氣泡。清洗聚光鏡前鏡和顯微鏡載玻片上的多余油,然后在鏡頭上涂抹一滴干凈的油。如果問題仍然存在,請在重新涂抹機油之前徹底清潔所有光學表面。
    問題:
    在高放大倍率下,膠體顆粒顯示不完整的牛頓環(huán),看起來不均勻照射。
    解決:聚光鏡可能偏離中心。切換到較低的倍率物鏡并重新調(diào)整聚光鏡的中心。仔細檢查以確定高倍率物鏡是否具有不同的中心,如果是,則將物鏡置于顯微鏡光軸上。

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    詞條說明

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