怎樣冷凍保存蛋白胨細(xì)胞

時(shí)間：2020-09-14作者：湟中禾豐生物科技有限責(zé)任公司瀏覽：555

蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存一直是生物科技以及醫(yī)療行業(yè)的難題，如何克服冷凍過程中的種種弊端，科學(xué)合理的冷凍蛋白胨細(xì)胞一直是業(yè)內(nèi)人士追求的課題，其實(shí)蛋白胨細(xì)胞的冷凍技術(shù)也并不復(fù)雜。

關(guān)于蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存方法如下：

1·傳統(tǒng)方法: 冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-80℃16～18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。-20℃不可**過1小時(shí)，以防止胞內(nèi)冰晶過大，造成蛋白胨細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

2·程序降溫：利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1～-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-80℃以下)-120℃，再放在液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。

冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

取與蛋白胨細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO最后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示完全之冷凍保存管中，1～2mlial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。


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• 詞條

  詞條說明

• 蛋白胨的純度

  蛋白胨根據(jù)其純度不同，雜質(zhì)含量多少可以分出很多等級，我國將各種化學(xué)試劑分成多個(gè)等級，不同等級有不同的標(biāo)準(zhǔn)，可用于不同的使用范圍。標(biāo)準(zhǔn)試劑：該類試劑為我國國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定，適用于檢驗(yàn)、鑒定、檢測。基準(zhǔn)試劑(PT，綠標(biāo)簽)：作為基準(zhǔn)物質(zhì)，標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液。優(yōu)級純(GR，Guaranteed Reagent 綠標(biāo)簽)(一級品)： 主成分含量很高、純度很高，適用于精確分析和研究工作，有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。分析純(

• 胰蛋白胨作用

  ? ?胰蛋白胨，又稱胰酪蛋白胨、胰酶消化酪蛋白胨，是一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化，濃縮干燥而成的淺黃色粉末。? ?含有豐富的氮源、氨基酸等，可配制各種微生物培養(yǎng)基，用于細(xì)菌的培養(yǎng)、分離、增殖、鑒定，以及無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等細(xì)菌生化特性試驗(yàn)用培養(yǎng)基的配置。? 胰蛋白胨還廣泛應(yīng)用于高品質(zhì)的抗生素、維生素、醫(yī)藥工業(yè)，氨基酸、**

• 胰蛋白胨

  ? ? 胰蛋白胨，又稱胰酪蛋白胨（Casein Tryptone）、胰酶消化酪蛋白胨（Pancreatic digest of casein），是一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，濃縮干燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好的物理性狀。國產(chǎn)的胰蛋白胨一般是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化而得到，與進(jìn)口的成分和工藝不同。進(jìn)口的胰蛋白胨以酪蛋白為基礎(chǔ)進(jìn)行消化，實(shí)為胰酪蛋白胨；而國產(chǎn)的是以肉

• 【胰蛋白胨】胰蛋白胨用途

  胰蛋白胨，又稱胰酪蛋白胨（Casein Tryptone）?? 、胰酶消化酪蛋白胨（Pancreatic digest of casein），是一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，濃縮干燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好的物理性狀。國產(chǎn)的胰蛋白胨一般是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化而得到，與進(jìn)口的成分和工藝不同。進(jìn)口的胰蛋白胨以酪蛋白為基礎(chǔ)進(jìn)行消化，實(shí)為胰酪蛋白胨；而國產(chǎn)的是以肉、