血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理

時(shí)間：2024-11-14作者：杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司瀏覽：48

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，細(xì)胞計(jì)數(shù)是一項(xiàng)基本功，對于標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)條件以及需要定量的實(shí)驗(yàn)來說都關(guān)鍵。這里介紹使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的經(jīng)典方法以及中間一些需要注意的細(xì)節(jié)。
制備細(xì)胞懸液：
對于貼壁生長的細(xì)胞，我們需要使用胰酶消化的方法使細(xì)胞從培養(yǎng)皿表面脫落
根據(jù)需要加入合適體積的培養(yǎng)基，將細(xì)胞進(jìn)行中和及稀釋，以得到均質(zhì)的細(xì)胞懸液。要求盡可能將細(xì)胞吹打散開，不要?dú)埩羧魏渭?xì)胞團(tuán)
準(zhǔn)備血細(xì)胞計(jì)數(shù)器：
使用70%乙醇將蓋玻片和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器清潔干凈
將將蓋玻片潤濕（使用水或呼一口氣，目的是使蓋玻片與血細(xì)胞計(jì)數(shù)器接觸較緊密，易于粘連），并覆蓋至血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上
臺盼蘭染色（可選）：
如果需要計(jì)算細(xì)胞的活力，則需要將細(xì)胞懸液和0.4%臺盼蘭等體積混合
室溫孵育3-5分鐘，使臺盼蘭進(jìn)入死細(xì)胞，使死細(xì)胞著藍(lán)色
血細(xì)胞計(jì)數(shù)器加樣：
使用吸管將細(xì)胞懸液或細(xì)胞/臺盼蘭混合液滴加到血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)池的邊緣。此時(shí)液滴將在虹吸的作用下進(jìn)入蓋玻片下方的計(jì)數(shù)池
以同樣的方式在另一側(cè)的計(jì)數(shù)池中也加入細(xì)胞懸液
將計(jì)數(shù)板放置幾分鐘使細(xì)胞擴(kuò)散，同時(shí)用吸水紙吸除多余的液體
細(xì)胞計(jì)數(shù)：
在100倍顯微鏡下，移動(dòng)計(jì)數(shù)板將視野對準(zhǔn)計(jì)數(shù)板的*大方塊，該方塊四周有一圈3條平行線包圍，中間有密集的網(wǎng)格。*方塊區(qū)差不多剛好可以填滿整個(gè)視野
使用手持式計(jì)數(shù)器記錄計(jì)數(shù)池四個(gè)角以及*方塊內(nèi)的細(xì)胞數(shù)（1-5號位置，經(jīng)典的current-protocol推薦每個(gè)方塊細(xì)胞數(shù)應(yīng)不大于20-50），并重復(fù)記錄另一側(cè)計(jì)數(shù)池中的細(xì)胞數(shù)，總計(jì)十個(gè)方塊。計(jì)數(shù)的方法是只計(jì)算上邊和左邊壓線的細(xì)胞，而右邊和下邊壓線的細(xì)胞不予計(jì)算（下圖，總體原則是“計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右”，判斷標(biāo)準(zhǔn)為是否接觸三條邊線的中間線）。如果有多個(gè)細(xì)胞沒有吹散成團(tuán)存在，此時(shí)只可記為一個(gè)細(xì)胞。如果團(tuán)塊很多，則可能需要重新吹打甚至消化直至絕大多數(shù)細(xì)胞為單個(gè)細(xì)胞
杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司專注于全自動(dòng)氮吹儀,一體化蒸餾儀,光化學(xué)反應(yīng)儀,氮?dú)獍l(fā)生器,分子蒸餾儀等, 歡迎致電 17366658694

• 詞條

  詞條說明

• 無菌檢查法 薄膜過濾法 集菌儀

  無菌檢查法 薄膜過濾法 集菌儀 集菌儀原理采用無菌檢測法中薄膜過濾法 集菌儀是集菌培養(yǎng)器的配套使用儀器，通過集菌儀的定向蠕動(dòng)加壓作用，供試品被正壓過濾并在濾器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，以檢驗(yàn)供試品是否含菌?？蓮V泛適用于用無菌制劑的無菌，包括類及含有抑菌成分的藥品、大輸液、水、醫(yī)療器具、無菌用水等，亦可用于食品、飲料行業(yè)等微生物限度檢查。無菌檢查法 薄膜過濾法 集菌儀 薄膜過濾法：采用封閉式薄膜過濾器（集菌器），

• 干式氮吹儀與水浴氮吹儀的加熱方法不同點(diǎn)

  吹干儀又稱為：濃縮裝置、吹掃儀，氮吹濃縮儀，樣品濃縮儀，簡稱：氮吹儀、吹氮儀，濃縮儀。通常是將吹入加熱樣品的表面進(jìn)行樣品濃縮，具有省時(shí)、操作方便、*控制等特點(diǎn)，可很快得到預(yù)期的。廣泛應(yīng)用于農(nóng)殘分析、商檢、食品、環(huán)境、制藥、生物制品等行業(yè)及用于液相、氣相及質(zhì)譜分析中的樣品制備中。干式氮吹儀與水浴氮吹儀的加熱方法：干式氮吹儀加熱方法：干式氮吹儀通過將吹入加熱樣品的表面，使樣品中的溶劑快速蒸發(fā)、分離，

• 索式提取器脂肪測定儀的檢修與使用

  奶類脂肪測定儀是采用比較法對奶的脂肪含量進(jìn)行測量的儀器。其特點(diǎn)是簡單、快捷、準(zhǔn)確。在奶品的貿(mào)易中，它所出據(jù)的數(shù)據(jù)是對各類奶品定價(jià)的重要依據(jù)。其工作原理為：先將稀釋液加溫到一恒溫溫度并排汽，再將鮮奶和稀釋液由分配系統(tǒng)配成1:15的混合液（稀釋液的作用是用以溶解鮮奶中的蛋白質(zhì)和消除混合液中的氣泡），然后再將混合液加壓均質(zhì)，讓一恒定光源透過混合液，并實(shí)現(xiàn)光電轉(zhuǎn)換，光電流與奶脂肪含量是線性關(guān)系。用已知脂肪

• 霉菌培養(yǎng)箱的保養(yǎng)方法

  1.培養(yǎng)箱外殼有效接地，使用完畢后，應(yīng)將電源關(guān)閉，以使用安全。2.培養(yǎng)箱應(yīng)放置在具有良好通風(fēng)條件的室內(nèi)，在其周圍不可放置易燃易爆物品。3.培養(yǎng)箱內(nèi)物品放置切勿過擠，留出空間。4.易耗品如密封圈、熱風(fēng)電機(jī)、加熱管等保修陸個(gè)月，應(yīng)定期保養(yǎng)，清潔灰塵。5.不宜在高電壓、大電流、強(qiáng)磁場、帶腐蝕性氣體（如含酸、堿、硫物質(zhì)），以免干擾損壞及發(fā)生危險(xiǎn)。6.要做好培養(yǎng)箱的日常維護(hù)保養(yǎng)工作，使用、維護(hù)應(yīng)有專職人