病毒滅活試驗(yàn) 病毒滅活包含哪些

    病毒滅活試驗(yàn) 病毒滅活包含哪些

    破壞微生物的生物學(xué)活性和破壞血清中補(bǔ)體的活性稱(chēng)之為滅活。滅活也指用熱力或化學(xué)品如甲醛、丙酮、酚等殺死致病性的病毒、細(xì)菌或其他微生物,制成滅活疫苗的處理方法。這些方法均不會(huì)損害微生物的保護(hù)性抗原。
    滅活是指用物理或化學(xué)手段殺死病毒、細(xì)菌等,但是不損害它們體內(nèi)有用抗原的方法。
    滅活病毒,會(huì)使病毒蛋白的**結(jié)構(gòu)受到破壞,蛋白不再有生理活性,所以失去感染,致病和繁殖能力,但是常規(guī)的滅活不影響病毒蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu),意思就是病毒蛋白的序列沒(méi)有變化。
    滅活激素,一般雄性個(gè)體會(huì)產(chǎn)生雌性激素,但雄性個(gè)體本身并不需要如此大量的雌性激素,所以雌性激素會(huì)在肝臟中滅活,來(lái)維持體內(nèi)穩(wěn)定。
    *系統(tǒng)對(duì)抗原的識(shí)別分成兩種,一種是構(gòu)像表位,一種是線(xiàn)性表位。構(gòu)象表位意思就是蛋白的三維結(jié)構(gòu),而線(xiàn)性表位就是蛋白的序列一級(jí)結(jié)構(gòu)。T細(xì)胞只需要識(shí)別線(xiàn)性表位就能接受*呈遞細(xì)胞給出的信號(hào),引發(fā)*反應(yīng)。
    所以滅活的病毒具有抗原性,但失去感染力。這個(gè)其實(shí)是很多疫苗的制造原理。


    滅活的病毒失去感染活性,但仍有融合活性。用于動(dòng)物細(xì)胞工程中的細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑。
    狂犬疫苗中的病毒是用β-丙內(nèi)酯(BPL)滅活的。
    β-丙內(nèi)酯(BPL)直接與病毒核酸作用,改變病毒核酸結(jié)構(gòu)達(dá)到滅活目的。
    甲醛也有滅活功能。

    應(yīng)用
    滅活疫苗通常用福爾馬林處理破壞其感染性,所以說(shuō)是“死的”?,F(xiàn)在對(duì)人廣泛使用的一的滅活病毒疫苗是流感疫苗。滅活的狂犬疫苗在緊急時(shí)才使用,其它的象索爾克脊髓灰質(zhì)炎疫苗和滅活的麻疹疫苗已經(jīng)被減毒的活疫苗所代替。
    現(xiàn)在多數(shù)滅活疫苗均是用1:4000甲醛在37℃經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間的作用,直至沒(méi)有剩余感染性但不影響其抗原性和*原性。然而,整個(gè)過(guò)程是經(jīng)驗(yàn)性的,對(duì)于甲醛或其它滅活劑對(duì)病毒滅活的化學(xué)作用了解得很少。
    一個(gè)理想的滅活劑必須對(duì)病毒核酸(它具有感染性)有特殊的滅活作用而對(duì)其衣殼或蛋白外膜(它具有*原性)沒(méi)有作用。當(dāng)然,甲醛不屬于這個(gè)范疇,因?yàn)樗瓤赏ㄟ^(guò)交聯(lián)使蛋白質(zhì)變性,又可與核苷酸的氨基作用。乙型丙內(nèi)酯或氧化精胺可能是這類(lèi)滅活劑的候選者。以核酸為一靶子的滅活劑(如羥胺)的一個(gè)主要問(wèn)題是可能誘導(dǎo)突變株,除非每一個(gè)核酸分子都被滅活劑擊中幾次或者滅活劑的作用不能產(chǎn)生突變株。在若干種病毒中已知紫外線(xiàn)能產(chǎn)生復(fù)數(shù)復(fù)原作用,因此不能用紫外線(xiàn)照射作為滅活劑。
    滅活疫苗較大的困難在于要生產(chǎn)足夠的病毒以提供所需量的有關(guān)抗原,還在于接種的途徑要像產(chǎn)生全身抗體一樣有利于促進(jìn)局部有關(guān)抗體的合成。流感病毒疫苗因劑量大常常引起發(fā)熱反應(yīng),特別是在幼兒。用乙醚或脫氧膽鹽裂解病毒毒粒能克服這些困難,這種“裂解疫苗”,現(xiàn)在已應(yīng)用。
    病毒滅活
    病毒失去感染性,稱(chēng)為滅活。了解滅活的條件不僅對(duì)從患者分離病毒、防腐和消毒是必要的,而且和疫苗生產(chǎn)也有關(guān)系。病毒滅活的機(jī)理有三。
    一、破壞包膜:包膜含有脂類(lèi)物質(zhì),因之有包膜的病毒可迅速被脂溶劑破壞,如乙醚、氯仿或去氧膽酸鈉可使病毒滅活。實(shí)際上可利用病毒對(duì)脂溶劑的敏感性來(lái)檢查病毒是否有包膜。物理因子,如滲透壓改變、凍融、熱和干燥等都可引起包膜破壞。一般認(rèn)為,呼吸道感染的病毒對(duì)于燥抵抗力弱,傳播主要是人間直接感染,這是因?yàn)橛邪さ脑省?br>二、病毒蛋白質(zhì)變性:能使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)制劑都能使病毒滅活,如酚、甲醛、次氯化物、酸和堿等。加熱引起變性也是有效滅活的方法。一般說(shuō)病毒對(duì)熱抵抗力弱,60℃幾分鐘就使之感染性明顯降低,因此在分離病毒時(shí),從患者取來(lái)的標(biāo)本需低溫保存,迅速送往實(shí)驗(yàn)室,長(zhǎng)期保存較好置于-80℃以下的低溫條件。
    三、病毒核酸的損害:X線(xiàn)、γ線(xiàn)等電離輻射可切斷核酸,紫外線(xiàn)可使核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚物,而破壞病毒基因的功能。另外吖啶橙或中性紅等染料可與病毒核酸結(jié)合,暴露于光線(xiàn)之下,可使核酸分解,而使病毒滅活。

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